CVD, CVD -htrA, et CVD Vaccins Typhoïdes Oraux Vivant: Une Progression Logique

CVD, CVD -htrA, et CVD Vaccins Typhoïdes Oraux Vivant: Une Progression Logique

La fièvre typhoïde reste un problème de santé publique important dans de nombreuses parties du monde Malgré la disponibilité de Tya Vivotif par voie orale; Berna Biotech et le vaccin polysaccharidique Vi par voie parentérale Typhim Vi; Aventis Pasteur, des vaccins améliorés contre la fièvre typhoïde ont été recherchés Ils comprennent une série de vaccins candidats développés au Center for Vaccine Development de l’Université du Maryland, basés sur l’atténuation de Salmonella enterica sérovar Typhi par des délétions dans les gènes aroC, aroD et htrA. les candidats, désignés «CVD», «CVD -htrA» et «CVD», ont été développés et testés chez des volontaires avec un succès variable. Cette revue résume les données cliniques qui ont orienté la progression logique de cette stratégie de développement de vaccins.

Théorie de l’excellence dans les maladies infectieuses et la médecine internationale à l’Université du Maryland a commencé avec les observations cliniques et les enquêtes de Theodore E Woodward Dans le s, Dr Woodward a trouvé « presque par accident » que la fièvre typhoïde a répondu au chloramphénicol, le premier Le Dr Woodward a mené des études prospectives qui ont permis d’élucider la pathogenèse de la fièvre typhoïde et l’efficacité des vaccins oraux, vivants ou morts, chez des volontaires sains atteints de Salmonella enterica sérovar Typhi S Typhi Le Dr Woodward était un fervent défenseur de l’Université du Maryland. Centre for Vaccine Development CVD à ses débuts au milieu des années, et il est le père académique des centaines de professeurs, des boursiers, des résidents, des étudiants et du personnel qui ont étudié et travaillé à la CVD au cours des années La fièvre typhoïde était un maladie commune en Europe, en Amérique et ailleurs avant les réformes de l’assainissement de la fin du XIXe et e Vers la fin du dix-neuvième siècle, la vaccination contre la fièvre typhoïde fut pratiquée rapidement comme moyen de lutte contre la fièvre typhoïde. Le premier vaccin parentéral tué contre S Typhi fut efficace, mais les effets indésirables locaux et systémiques Les effets ont été fréquents et parfois sévères. Un vaccin oral, atténué par mutagenèse chimique et conçu pour imiter l’infection naturelle de la muqueuse, a été développé dans les Ce vaccin, Tya, actuellement disponible sous le nom de Vivotif Berna Biotech, est bien toléré et efficace. Parmi ces inconvénients, citons le manque de définition des mutations atténuantes et la nécessité de doses multiples pour une immunogénicité optimale. A l’aube de l’ère de la biologie moléculaire, de nouvelles souches atténuées de S Typhi avec des mutations génétiques définies et une immunogénicité plus forte que Tya ont été détectées. Un certain nombre de ces souches ont été développées, et plusieurs ont été testées chez l’homme, y compris Ty, wh ich est muté dans phoP / phoQ ; χ, qui est muté dans cya et crp ; et MOZH, qui est muté dans aroC et ssaV Pendant ce temps, une série de souches basées sur des mutations dans aroC et aroD a également été développée et testée chez l’homme sur une période d’un an commençant à la CVD Dans le présent article, nous décrire l’histoire et la lignée de ces souches vaccinales L’histoire de ces souches illustre les tribulations du test de vaccin en phase et décrit un vaccin échoué trop réactogène, un qui était sous-immunogène, et un qui peut atteindre l’équilibre requis entre immunogénicité et réactogénicité

CVD

Une approche pour atténuer S Typhi a été de développer des auxotrophes nutritionnels en interrompant la voie de biosynthèse des métabolites aromatiques, ce qui rend les organismes Salmonella dépendants nutritionnellement de l’acide p-aminobenzoïque et des substrats -dihydroxybenzoates non disponibles pour les bactéries dans les tissus des mammifères. les délétions dans les gènes de cette voie sont incapables de synthétiser le précurseur de l’acide chorismique des composés aromatiques acide p-aminobenzoïque et dihydroxybenzoate, et il n’existe aucune autre voie permettant de surmonter cette déficience chez les organismes Salmonella. Par conséquent, les bactéries aro-délétères ne peuvent pas prolifèrent dans les cellules de mammifères, mais les organismes croissent suffisamment longtemps pour stimuler les réponses immunitaires. L’inactivation de l’aroC ou de l’aroD entraîne indépendamment une atténuation, mais des délétions dans les deux fournissent un niveau élevé de sécurité contre la restauration de la pathogénicité par recombinaison. dérivé aroC / aroD-supprimé de S Typhi st La pluie Ty le parent de Tya et désigné la souche « CVD » Deux études de phase, escalade de la dose de CVD ont été menées chez les patients hospitalisés à la CVD Après une dose orale unique de × ou × cfu, le vaccin était bien On a décelé des anticorps anti-LPS anti-lipopolysaccharides IgG sériques, et des ASCs anti-LPS sécrétrices d’anticorps IgA ont été détectés chez des volontaires . Dans des études cliniques subséquentes, une bactériémie vaccinale auto-limitée cliniquement silencieuse est survenue chez% des volontaires après une dose unique d’organismes x et chez des volontaires après une dose unique d’organismes x; cette bactériémie s’est produite – jours après la vaccination [, -] L’explication n’a pas impliqué de réversion génétique à la virulence, parce que les isolats de sang et de selles retrouvés conservaient leur phénotype auxotrophe lorsqu’ils étaient cultivés sur un milieu minimal. la virémie vaccinale transitoire était bien connue des personnes ayant reçu des vaccins antirubéoliques et de type poliovirus vivants, et la virémie vaccinale contribue probablement à la forte immunogénicité de ces vaccins efficaces [, -] bactériémies silencieuses, avec un ensemencement d’organes tels que le foie et la rate. de la moelle osseuse, est l’une des étapes de l’infection par S Typhi et est susceptible de stimuler des réponses immunitaires protectrices vigoureuses. D’autre part, on pense que la bactériémie vaccinale pourrait induire une réactogénicité inacceptable dans de futures études impliquant un plus grand nombre de volontaires. , personnes âgées et personnes immunodéprimées réactogénicité clinique, l’apparition de vaccinémies rendrait plus difficile la voie de l’homologation Il y avait place à amélioration

CVD -HTRA

Dans une collaboration fructueuse avec Gordon Dougan du Collège Impérial de Science, de Technologie et de Médecine et Stephen Chatfield de Medeva Group Research, une mutation supplémentaire dans le gène a été recherchée pour améliorer l’atténuation des maladies cardiovasculaires. htrA a été construit chez des organismes de Salmonella et semblait prometteur dans des études précliniques. htrA code pour une protéine de choc thermique chez les organismes de Salmonella; Lorsque le gène est délété, le mutant résultant est moins virulent en raison d’une capacité réduite à survivre et à se répliquer dans les tissus hôtes In vitro, les mutants htrA de S Typhimurium sont plus sensibles à la destruction oxydative dans les macrophages. htrA et désigné « CVD -htrA », a été construit et étudié chez des volontaires hospitalisés. Le CVD -htrA a conservé l’immunogénicité du CVD parent, mais aucune bactérémie vaccinale n’a été détectée parmi les volontaires qui ont reçu une dose unique de ×, ×, ou × cfu, malgré Les réponses immunitaires mesurées par les taux de séroconversion avec IgG anti-LPS après vaccination avec CVD et CVD-htrA étaient similaires Presque tous les volontaires ont développé des réponses ASC, quelle que soit la souche vaccinale reçue Réponses lymphoprolifératives significatives aux flagelles et aux particules antigène après la vaccination CVD -htrA ont également été observés A ce stade, les études cliniques de d Les CVD -htrA impliquaient des organismes fraîchement récoltés issus de cultures stockées congelées. Les jours de vaccination, les souches vaccinales étaient récoltées à partir de plaques d’agar, lavées et diluées à la taille d’inoculum appropriée. L’étape cruciale suivante consistait à développer une formulation pratique de MCV -htrA pour les futures études de phase et de phase En s’appuyant sur le succès initial de CVD -htrA fraîchement récolté, un collaborateur industriel a été identifié Peptide Therapeutics Group, et une formulation pratique de CVD -htrA a été produite par Evans Medical à son usine de Speke, Royaume-Uni Cette formulation consistait en des organismes vivants lyophilisés dans des flacons en verre à dose unique à remettre en suspension dans une solution tampon. Une étude de sécurité de phase et d’immunogénicité de CVD -htrA, formulée sous forme de lyophilate, a été approuvée pour les patients ambulatoires. Des volontaires ambulants adultes en bonne santé ont été randomisés pour recevoir, avec un tampon, une seule administration orale de CVD -htrA à forte dose. × cfu, CVD plus faible -htrA × cfu, ou placebo Le jour, il y avait un croisement dans lequel les volontaires qui avaient ingéré le vaccin CVD -htrA le jour recevaient un placebo et ceux qui avaient reçu le placebo le jour recevaient le vaccin CVD -htrA dans soit la dose élevée, soit la dose inférieure L’incidence des effets indésirables était la même chez les receveurs du placebo, du vaccin à forte dose ou du vaccin à faible dose après la vaccination Diarrhée, une préoccupation potentielle observée chez un petit nombre de vaccinés dans l’étude de phase non contrôlée Une différence statistiquement insignifiante est survenue chez les patients recevant le placebo,% chez les vaccinés à faible dose et% chez les vaccinés à forte dose. Toutefois, dans une analyse secondaire de l’incidence des symptômes dans les premiers jours suivant la vaccination, les les doses de vaccin ont été légèrement plus susceptibles d’avoir eu un taux de diarrhée que les personnes recevant le placebo% P = Aucun receveur du vaccin à faible dose n’a eu de diarrhée dans les premiers jours après la vaccination nImportant, tous les résultats de l’hémoculture étaient négatifs dans cette étude Après l’ingestion du vaccin à faible dose,% des volontaires ont éliminé la souche vaccinale dans leurs selles pendant quelques jours. Parmi les receveurs du vaccin à forte dose,% On a détecté des ASCs producteurs d’IgA anti-LPS en% des receveurs de la moyenne géométrique du vaccin à forte dose, des ASCs par PBMC et en% des receveurs du vaccin à faible dose, avec une perte maximale de × cfu / g. moyennes géométriques, ASCs par PBMCs Des ASC produisant un antigène IgA anti-H sont apparus en% et% de receveurs de vaccins à forte et faible doses, respectivement des réponses anti-LPS sériques d’IgG en% et en% de receveurs de vaccins à forte et faible dose, avec des titres moyens géométriques de et, respectivement, après immunisation Notamment, aucun des volontaires n’a développé d’augmentation des IgG sériques Anticorps de la capsule polysaccharidique Vi Réponses lymphoprolifératives à S Typhi flagella et à des particules entières S Typhi par les PBMC obta La souche CVD -htrA semble répondre à bon nombre des critères d’amélioration du vaccin oral contre la typhoïde. Contrairement à Tya multidose, la CVD -htrA à dose unique stimulée réponses immunitaires muqueuses, humorales et cellulaires vigoureuses qui égalaient ou surpassaient celles mesurées après plusieurs doses de Tya

CVD

Pendant ce temps, pendant ce temps, le vaccin intramusculaire Vi polysaccharidique Typhim Vi; Cependant, la CVD -htrA administrée par voie orale offrait des avantages potentiels substantiels par rapport au vaccin polysaccharidique Vi par voie parentérale, en ce sens que la CVD-htrA provoquait un éventail de réponses immunitaires, y compris des réponses cellulaires, et La mémoire immunologique n’a pas été provoquée par le polysaccharide Aucun des nouveaux candidats vaccinaux par voie orale tels que CVD, CVD -htrA, Ty, et MOZH, cependant, était cohérent dans leur capacité à stimuler le sérum Vi anticorpsOne indice pour expliquer cette observation est que l’expression de Vi est très réglementé Vi expression in vivo se produit lorsque les bactéries existent dans des environnements extracellulaires, tels que le sang et la bile, où ils sont protégés contre la bactérie dépendante des anticorps O dépendante du complément Vi expression est désactivée lorsque les bactéries résident dans les macrophages et cellules dendritiques dans le tissu lymphoïde associé à l’intestin Au moins les systèmes à composants séparés, rcsB-rcsC et ompR-envZ , régulent l’expression de Vi MM L a proposé que, en rendant l’expression de Vi constitutive dans CVD -htrA, la souche orale pourrait susciter des réponses d’anticorps anti-Vi sériques et muqueuses en plus des réponses aux antigènes de cellules entièresMML et ses collègues ont remplacé la PtviA hautement régulée dans la souche CVD S du vaccin Typhi -htrA avec le promoteur constitutif fort Ptac, résultant en une souche désignée « CVD » Dans une étude clinique, des volontaires ambulatoires en bonne santé recevaient une seule dose orale de CVD de – cfu, et des adultes en bonne santé recevaient des doses de × cfu par dose avec Dans ce cas, le vaccin a été fraîchement récolté à partir d’une culture mère congelée. Les réponses sérologiques à l’antigène L Typhi LPS et H étaient vigoureuses, comme cela avait été observé après l’administration de CVD -htrA After ou des doses de CVD, presque tous les volontaires. Ceci a été encourageant, car la présence de la capsule de polysaccharide Vi aurait pu interférer avec les réponses immunitaires à d’autres structures de surface cellulaire. Seulement% des volontaires qui ont ingéré une seule dose et seulement% des volontaires ayant ingéré des doses ont développé des IgG anti-Vi sériques . Cependant, des réponses ASC anti-Vi d’IgA ont été détectées chez% des volontaires ayant reçu la CFU; Dans tous les cas sauf volontaire, cette réponse est survenue après une seule dose. Ces réponses ASC spécifiques de Vi ont fourni des preuves convaincantes que l’antigène Vi était exprimé et traité immunologiquement, même si les réponses d’anticorps sériques étaient maigres. Anticorps IgG contre Vi Il est possible que le système immunitaire ait été sensibilisé à cet antigène et une réponse anamnestique protectrice suivrait une infection par des études de type Typhi de type sauvage pour examiner cette question et l’avenir du vaccin contre les maladies cardiovasculaires est en cours.

Conclusion

L’Organisation mondiale de la santé estime que des millions de cas de fièvre typhoïde surviennent chaque année, entraînant des décès Malgré la disponibilité de Tya Vivotif et du vaccin polysaccharidique Vi, Typhim Vi, l’Organisation mondiale de la Santé et la communauté élargie reconnaissent que les vaccins contre la fièvre typhoïde sont améliorés. Les polysaccharides Tya et Vi ne sont que modérément efficaces% -%, et leur efficacité chez les enfants de moins de dix ans n’est pas acceptable ou inconnue Dans certaines régions du monde au moins, la fièvre typhoïde est fréquente chez les enfants. ans Le besoin urgent d’un vaccin sûr et efficace est encore plus impérieux dans les régions où S Typhi résistant aux antibiotiques est répandu stimulant. Les nouveaux vaccins conjugués Vi-protéine , ainsi que certaines nouvelles souches vaccinales orales, y compris CVD -htrA et , peut-être, CVD, offrent des raisons d’optimisme Le processus de découverte bégayante mais logique, illustré par le développement de CVD, CVD -htrA et CVD, est une progression que le Dr Woodward a comprise et célébrée

Remerciements

Nous reconnaissons l’aide inestimable du personnel du Centre pour le développement des vaccins et l’Université du Maryland Centre de recherche clinique générale National Institutes of Health / Centre national de ressources de recherche subvention MO RRFinancière nationale Institut national des allergies et des maladies infectieuses, National Institutes of Health subventions Cet article a été publié dans le cadre d’un supplément intitulé «Hommage à Ted Woodward», parrainé par une subvention sans restriction de Cubist Pharmaceuticals et un don de John G McCormick de McCormick & amp; Company, Hunt Valley, Maryland Conflits d’intérêts potentiels MML est le coinventeur du brevet pour les souches atténuées de Salmonella enterica sérovar Typhi qui expriment de manière constitutive l’antigène polysaccharidique capsulaire Vi. Aucune entreprise n’a concédé sous licence cette technologie COT: aucun conflit