Exactitude d’un système commercial basé sur la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel pour la mesure des niveaux d’ARN du VIH autour de la limite de quantification du dosage

Exactitude d’un système commercial basé sur la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel pour la mesure des niveaux d’ARN du VIH autour de la limite de quantification du dosage

Les tests de quantification du niveau d’ARN du VIH de type virus de l’immunodéficience humaine basés sur la réaction en chaîne de la polymérase reverse-transcriptase en temps réel La PCR est récemment disponible dans le commerce Ces nouveaux tests sont très précis et ont une plus grande portée linéaire Par conséquent, les cliniciens ont été attirés par l’utilité de ces tests en pratique clinique et pour des essais expérimentaux. Récemment, Rebeiro et al ont rapporté que, suite à un changement de la routine de surveillance de l’ARN du VIH de routine. un test Amplicor ultrasensible au Cobas Ampliprep / Cobas TaqMan HIV- comme dit [CAP / CTM; tous deux fabriqués par Roche], les patients atteints de suppression virologique avaient parfois des niveaux d’ARN VIH détectables Ils ont expliqué ces différences comme des «artefacts» dus à la congélation d’échantillons dans des tubes de préparation de plasma primaire. ont été déterminés à avoir des niveaux d’ARN du VIH & lt; copies / mL sur la base de la procédure de laboratoire de référence à base d’ADN ramifié Versant HIV-; Des échantillons de Siemens ont été prélevés chez des patients hospitalisés à l’hôpital « Lazzaro Spallanzani » Rome, Italie. Le plasma a été séparé du sang total après la collecte et congelé en aliquots jusqu’à utilisation. Quatorze échantillons% ont des niveaux détectables d’ARN du VIH, – copies / mL par CAP / CTM Il n’a pas été possible de retester en raison de volumes plasmatiques insuffisants. Cependant, pour les patients, les taux d’ARN du VIH sont restés constants & lt; copies / mL pendant – mois après avoir comparé les tests, suggérant que les «blips» dans le niveau d’ARN VIH détectés par CAP / CTM n’étaient pas prédictifs d’un rebond viral à venir. Au contraire, la faible précision des déterminations du taux d’ARN du VIH près de la limite inférieure de quantification pourrait être responsable de ces résultats discordants. Pour vérifier cette hypothèse, nous avons réanalysé des échantillons prélevés sur le service ambulatoire de l’hôpital Amedeo di Savoia de Turin, en Italie, qui utilise le CAP / CTM comme échantillon de routine. les charges virales qui étaient proches du niveau de coupure et & lt; copies / ml et ont été réanalysés avec le même test Vingt-sept pour cent des échantillons présentaient des taux d’ARN du VIH constants, tandis que le pourcentage a donné des taux d’infection. copies / mL dans le nouveau test; de ceux-ci avaient le résultat «cible non détectée» et avaient une cible détectée mais un niveau inférieur à la limite de quantification des copies de l’essai CAP / CTM / ml. L’exactitude du test CAP / CTM a été évaluée en utilisant des aliquotes de BBI Diagnostics, un panel de test VIH-ARN prêt à l’emploi, disponible dans le commerce, contenait des concentrations de VIH-ARN allant de à, copies / mL. Les résultats indiquent une forte corrélation entre les valeurs de VIH-ARN observées et attendues. cependant, les coefficients de variation étaient élevés aux faibles concentrations d’ARN du VIH, ce qui suggère que la précision du test est plus faible lorsque les valeurs d’ARN du VIH sont proches de la limite de quantification.

Figure View largeTélécharger la lameÉvaluation de la précision du test VIH Cobas Ampliprep / Cobas TaqMan Roche avec utilisation d’aliquotes répliquées à partir d’un panel de test VIH-ARN prêt à l’emploi BBI DiagnosticsFigure View largeTélécharger la lameÉvaluation de la précision du Cobas Ampliprep / BBI DiagnosticsNos données montrent que le test CAP / CTM peut surestimer les valeurs de l’ARN du VIH autour de la limite inférieure de quantification, même lorsque le test de dépistage de l’ARN-VIH est disponible. Des procédures appropriées pour la préparation et la conservation des échantillons sont utilisées Un débat est en cours sur la signification des « blips » au cours d’un traitement antirétroviral efficace à long terme La plupart des données existantes suggèrent que de petites augmentations occasionnelles au-dessus du niveau VIH-ARN peuvent ne pas être cliniquement pertinentes ou peut même refléter des résultats faussement positifs associés à des erreurs du système de diagnostic Par conséquent, pour le traitement du VIH – i Chez les individus infectés et dans les essais expérimentaux, la précision est essentielle pour distinguer les changements cliniques véritablement significatifs de la charge virale des «artefacts» du bruit de fond et des épisodes intermittents de «blips» de la virémie détectables

Remerciements

Nous reconnaissons la généreuse contribution de Roche Diagnostics, qui a fourni une partie des kits CAP / CTM VIH-ARN utilisés dans l’étude. Soutien financier Ministère de la Santé italien, fondi Ricerca Corrente Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits