Prévalence de Candida dubliniensis Fungemia dans un grand hôpital universitaire

Prévalence de Candida dubliniensis Fungemia dans un grand hôpital universitaire

Les rapports de cas de maladie systémique due à Candida dubliniensis sont en augmentation, étant donné la disponibilité de nouveaux tests diagnostiques qui peuvent différencier avec précision ce pathogène du Candida albicans phénotypiquement similaire L’hybridation in situ fluorescente acide nucléique peptidique PNA FISH utilise des marqueurs fluorescents Sondes PNA qui ciblent les séquences hautement spécifiques de C albicans et C dubliniensis Une méthode basée sur la PCR utilisant des amorces C albicans spécifiques dérivées de la séquence du gène PHR a été utilisée avec succès pour différencier les albicans C et les isolats C dubliniensis avec un% de sensibilité et de spécificité. Des analyses du génome de C dubliniensis ont montré que C dubliniensis code une gamme de gènes de virulence similaires à ceux codés par C albicans, tels que la séquence agglutinine-like et les familles aspartyl-protéinases sécrétées de gènes impliqués dans l’adhérence et la sécrétion de protéases. ] En outre, une attention considérable a été accordée à C dubliniensis, en raison de sa capacité à développer une résistance au fluconazole, le médicament le plus couramment utilisé pour le traitement des patients infectés par le VIH avec ou sans SIDA, en raison d’un mécanisme de résistance au fluconazole facilement inductible [,,,] Des infections à C dubliniensis ont été signalées chez des patients atteints de diverses maladies sous-jacentes. Cependant, seul un cas de fongémie à C dubliniensis chez un patient infecté par le VIH a été rapporté. Nous décrivons ici des cas de fongémie C dubliniensis chez des patients de l’Université de Maryland Medical System Baltimore déterminé sur la base de la récupération de C dubliniensis à partir de cultures sanguines entre Mars et Novembre Patients et méthodes Après l’approbation du comité d’examen institutionnel, les données cliniques ont été recueillies pour les patients hospitalisés présentant des symptômes de septicémie. avec des hémocultures positives pour la levure pendant la même période. Isolats de Cependant, les isolats de tube germinatif, produisant des chlamydospores, récupérés chez des patients ayant eu une seconde hémoculture avec un résultat positif n’ont pas été identifiés comme étant des albicans C et ont donc été présumés être des individus du groupe C dubliniensis. Testé sur ChromAgar Candida Becton Dickinson pour la capacité de croissance en ° C et pour la couleur des colonies Le test PNA FISH AdvanDx a été réalisé sur des lames de microscope sur des frottis directement obtenus à partir de hémocultures de levure Gram positives, selon les instructions du fabricant. Les frottis des échantillons de culture ont été incubés avec une sonde PNA, lavés, séchés à l’air et examinés au microscope fluorescent. Les résultats positifs ont été indiqués par une couleur verte fluorescente L’amplification a été réalisée sur ADN génomique des souches C albicans ATCC et LHG et de souche C dubliniensis CD avec des amorces PHR spécifiques de C albicans en utilisant Promega PCR Master Mix Promega Prod Les tests de sensibilité au fluconazole ont été effectués et interprétés conformément aux recommandations du protocole de microdilution en bouillon NCCLS Résultats Données démographiques et cliniques du patient et informations sur le traitement antifongique qu’il a reçu sont résumés dans le tableau Les patients infectés par le VIH recevaient du fluconazole avant d’être admis à l’hôpital pour une candidose orale; l’un a eu une endocardite à Staphylococcus aureus sensible à la méthicilline et n’a pas survécu, et l’autre a été traité avec succès avec fluconazole Un patient avec endocardite à S aureus résistant à la méthicilline n’a pas répondu au traitement par fluconazole et est décédé Un patient a été traité avec succès avec fluconazole et traitement contre la caspofungine

Tableau View largeTélécharger slideCaractéristiques des patients atteints de Candida dubliniensis récupérés dans la circulation sanguineTable View largeTélécharger slideCaractéristiques des patients atteints de Candida dubliniensis récupérés dans la circulation sanguineUn total d’isolats de Candida récupérés à partir des hémocultures ont été identifiés Parmi ceux-ci, étaient C albicans, C étaient parapsilosis, C glabrata, étaient C dubliniensis, étaient C tropicalis, C krusei, et C lusitaniae Des cas d’infection de la circulation sanguine Candida, étaient dus à C dubliniensis, avec un taux de récupération de% Les isolats de C dubliniensis ont produit des tubes germinatifs et des chlamydospores abondantes, ont augmenté colonies vertes sur ChromAgar Candida, ne se développent pas à ° C, ne s’hybrident pas avec la sonde PNA FISH pour C albicans, mais s’hybrident avec une sonde PNA FISH pour C dubliniensis ostéoporose. PCR L’amplification PCR de l’ADN des souches de C albicans aboutit à un fragment avec la taille prédite de kb, mais pas amplimers ont été détectés par amplification PCR de l’ADN de la Nombre d’isolats de C dubliniensis Tous les isolats cliniques de C dubliniensis étaient sensibles au fluconazole, avec des CMI de – μg / mL

Figure Vue largeDownload slideRésultats de l’analyse d’hybridation fluorescente in situ d’acide nucléique peptidique pour la détection de Candida dubliniensis en utilisant une sonde spécifique de C dubliniensis A et une sonde spécifique de Candida albicans BFigure View largeTélécharger les résultats de l’analyse d’hybridation fluorescente in situ d’acide nucléique peptidique pour la détection de Candida dubliniensis en utilisant une sonde spécifique à C dubliniensis A et une sonde spécifique à Candida albicans B

symptôme de septicémie Deux des patients sont morts et sont restés hospitalisés au moment de l’écriture. Les isolats ont été confirmés comme étant C dubliniensis après hybridation avec la sonde PNA FISH spécifique au C dubliniensis. Tous les isolats étaient sensibles au fluconazole pendant la même période. Des cas d’infection à C dubliniensis ont été rapportés, des fongémies de levures ont été rapportées en laboratoire clinique. L’incidence de fongémie due à C dubliniensis n’est pas connue avec certitude, car tous les laboratoires cliniques ne distinguent pas cette espèce des C albicans morphologiquement similaires. L’infection par C dubliniensis n’est pas détectée ou est signalée à tort comme une infection à C. albicans et, par conséquent, cette identification précise des espèces en utilisant des méthodes moléculaires, telles que PNA FISH ou PCR, peut aider à déterminer l’incidence réelle de C dubliniensis. les caractéristiques de virulence associées à C albicans, Il est intéressant de noter que dans une étude de Zepelin et al , l’inclusion du fluconazole dans le milieu de test a entraîné une augmentation de l’adhérence de C dubliniensis aux cellules Vero, ce qui pourrait expliquer le taux de récupération élevé de cette espèce. Patients infectés par le VIH avec ou sans SIDA et recevant un traitement par fluconazoleDeux études de surveillance multicentriques à grande échelle sur l’incidence des infections sanguines à Candida ont été réalisées aux États-Unis pendant les – Les résultats de la première étude ont montré que albicans étaient en fait C dubliniensis, alors que la deuxième étude qui a analysé la distribution des espèces de Candida a révélé un taux de récupération de C dubliniensis de% Dans une étude rétrospective faite à notre institution pendant une période de et entre, dépistage de & gt; isolats identifiés comme albicans C qui ont été récupérés de patients avec une variété de conditions immunodéprimantes, y compris l’infection par le VIH, a entraîné un taux de récupération% pour C dubliniensis Dans la présente étude, des cas d’infection sanguine Candida, étaient dus à C dubliniensis, avec un% taux de récupération supérieur aux taux de récupération pour C tropicalis%, C krusei% et C lusitaniae% Les données actuelles suggèrent que, en raison d’un manque de connaissance de la distinction entre C dubliniensis et C albicans, la prévalence de C dubliniensis A notre connaissance, des cas de fongémie et d’infection systémique dus à C dubliniensis ont été rapportés dans la littérature [, -] Un seul cas était survenu chez une personne infectée par le VIH, et la majorité était chez des patients avec une variété. d’autres conditions immunodéprimantes, y compris diverses malignités, neuroblastome, tuberculose disséminée, hépatosplénomégalie avec insuffisance rénale aiguë, lupus érythémateux disséminé Une récidive d’insuffisance rénale chronique, de maladie hépatique, de transplantation d’organe solide et de myélome multiple avec C dubliniensis dans le liquide synovial [, -] Récemment, un taux relativement élevé de colonisation a été signalé dans une population de patients atteints de fibrose kystique. des patients sans immunocompromisance connue, suggérant que cette espèce est associée au même spectre de maladie que celui de C. albicans et que les individus infectés par le VIH ne sont pas la seule population sensible à l’infection à C. dubliniensis. Chez des patients infectés par le VIH, des cas de fongémie à C dubliniensis ont été signalés chez des patients infectés par le VIH à ce jour. Des inquiétudes ont été exprimées à propos du développement de la résistance au fluconazole chez le C. dubliniensis, en particulier chez les isolats infectés par le fluconazole. La résistance au fluconazole a été démontrée dans des isolats cliniques et n étude in vitro, dans laquelle un isolat de C dubliniensis a rapidement développé une résistance stable au fluconazole après l’exposition au médicament D’autre part, les tentatives de produire une souche de C albicans résistante au fluconazole ont échoué Ce potentiel de développement rapide de la résistance Il est crucial d’identifier C dubliniensis comme agent causal dans les cas de fongémie et d’effectuer un test de sensibilité antifongique sur chaque isolat pour confirmer la susceptibilité azole. La démonstration que C dubliniensis a le potentiel de provoquer une infection sanguine fournit des informations cruciales sur l’importance clinique et les caractéristiques épidémiologiques À la lumière de ces rapports croissants sur la signification pathogénique de C dubliniensis, une identification précise de cette espèce dans le laboratoire clinique est justifiée Cette tâche est devenue faisable et pratique avec l’émergence récente de tests simples et très spécifiques, tels que le PNA FISH test, qui peut être utilisé une surveillance à grande échelle basée sur la population pour une infection sanguine, afin d’estimer avec plus de précision l’incidence de la candidémie due à C dubliniensis

Remerciements

Soutien financier Institut national de recherche dentaire et craniofaciale, subvention des instituts nationaux de la santé DE Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: aucun conflit